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(1)从嗜热菌中提取总 DNA,采用PCR技术对T 基因进行扩增。PCR反应体系(3）将重组质粒导人大肠杆菌时，常先用Ca²+处理细胞，其目的是(2)图 1质粒中的结构①是（4）已知空间上邻近的两个半胱氨酸易形D.引物 IC.引物B.引物A.引物I：中引物的设计非常关键，据图表分析，扩增T基因时可选择的一对引物是中需添加的物质有缓冲液质粒的受体菌，应在筛选培养基中添加功表达，常用的分子检测方法是为进一步提高T酶的耐热性，研究人成二硫键，从而提升蛋白质的耐热性生物学卷（六）第8页（共8页）酶的功能越关键),如图 2 所示。根据和保守度（保守度值越大表明该位点对员分析了五个氨基酸位点的空间距离替换成半胱氨酸最合适，原因是分析结果，选择第JI :......GGAAGCTT.....J I .......GAATTCCC......T基因导人大肠杆菌后，若要检测该基因在大肠杆菌细胞中是否成.......GGGAATTC......酶切、重组抗性基因抗生素A位的氨基酸大肠杆菌质粒其主要作用是引物Ⅱ引物Ⅱ引物I.·...·CATATGAG....引物I .·...CTCATATG..··EcoR I（答出两点）、dNTP 和引I物等。PCR 反应Sal INdeI嗜热菌保守度：0.31第44位注：虚线长度代表氨基酸间的空间距离【26·新高考·MNJ·生物学·SSQN】全国100所名校高考模拟示范卷保守度：0.92第45位Hind ⅢIEcoR I精氨酸赖氨酸Sal INde I限制酶氨酸半胱图2识别序列及切割位点氨酸3'—CAGCTG5'—GTCGAC-—3'3'-—TTCGAA-55'—AAGCTT-3'3'—CTTAAG-55'——GAATTC-—3’3'-GTATAC-55′—CATATG-3第119位为了筛选出转人了保守度：0.83第76位第293位S