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(3)电刺激；C+载体；乙醇；蛋白酶合成抑制剂（任答1点）细胞分裂和发育(2分，答全给分)二者（的核遗传物质虽然相同，但)细胞质中的遗传物质有区别(2分，合理即可)(4)人工授精；体外受精；胚胎分割等（任答1点，合理即可）【解析】(1)体外培养动物的体细胞时，培养基中应含有细胞所需要的糖类、氨基酸、无机盐、维生素等营养物质，此外，还需要加入血清等一些天然成分。(2)采集到的动物卵母细胞，需在体外培养到MⅡ期。去除动物卵母细胞的细胞核，目前普遍采用显微操作法。(3)获得的重构胚一般可用物理或化学方法进行激活，如电刺激、C+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等，从而使其能够完成细胞分裂和发育进程。通过图中路线获得的白头叶猴后代与核供体的性状并不完全相同，其原因可能是二者的核遗传物质虽然相同，但细胞质中的遗传物质有区别。(4)除上述技术路线外，还可以使用人工授精、体外受精、胚胎分割等现代生物技术来人工繁育白头叶猴。25.【答案】（除注明外，每空1分）(1)RNA聚合磷酸二酯键(2)逆转录不含有(3)①XhoI、MumI(2分，顺序错不给分)②CG3基因控制合成的肽链进人内质网继续合成、再加工（合理即可）可以通过控制培养液中以甲醇作为唯一碳源，进而控制hCG邛基因的表达(2分，合理即可)③实现重组DNA(或环化质粒)的大量扩增（合理即可）不需要抗原和抗体特异性结合【解析】(1)启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，RNA聚合酶能催化磷酸二酯键的形成。(2)提取该基因转录得到的mRNA,经逆转录过程可得到cDNA。该cDNA序列中不含有CAT盒序列，因为CAT盒存在于启动子区，不属于基因转录序列。(3)为防止目的基因与质粒的自身环化并保证连接的方向性，可在hCG3基因左右两端分别添加限制酶的识别序列。根据限制酶的识别序列及酶切位点，SmaI酶切会破坏目的基因，EcoR I酶切会破坏质粒上的氨苄青霉素抗性基因（标记基因），SalI酶切会破坏质粒上的组氨酸合成酶基因，XmaI识别序列与SmaI识别序列相同，也会破坏目的基因。因此，应选择XhoI和MumI。甲序列指导合成的信号肽能引导后续合成的肽链进人内质网腔，因此hCG3基因与甲序列一起构建形成融合基因后有利于hCG3基因控制合成的肽链进入内质网继续合成、再加工。AOX1为甲醇氧化酶基因的启动子，其只能在以甲醇为唯一碳源的培养基中正常表达，选用AOX1作为CG邛基因启动子的优势是可以通过控制培养液中以甲醇作为唯一碳源，进而控制hCG3基因的表达。阶段Ⅱ是为了实现重组DNA(或环化质粒)的大量扩增。由于环化质粒中含有组氨酸合成酶基因，因此为筛选导入重组质粒的酵母菌，培养基中不需要再加入组氨酸。阶段V采用抗原一抗体杂交法进行检测，其原理为抗原和抗体特异性结合。【高二生物学参考答案第4页（共4页）】24601B